编者按

通过免疫调节恢复乙肝病毒特异性免疫功能是实现临床治愈的重要途径，已有的证据认为HBsAg特异性B细胞功能失调、肝脏有明显B细胞浸润、非典型记忆B细胞（AtM B）富集是B细胞在慢乙肝免疫机制中的关键特征。

近期发表的一项研究表明，不同临床分期慢乙肝患者肝脏中的AtM B细胞频率均相对较低，与外周血中的频率接近。而肝脏中的浆细胞（效应B细胞）频率明显高于外周血，特别是在高病毒载量和ALT升高的阶段。肝内浆细胞表现出增殖迹象，尤其在免疫活动期。

研究方法

纳入62名处于不同临床分期的慢乙肝患者，包括免疫耐受期（IT）5例、免疫活动期（IA）4例、非活动性携带状态（IC）18例、HBeAg阴性慢乙肝（ENEG）4例、HBsAg清除（SNEG）20例、接受核苷类药物（NUC）治疗患者11例，对受试者配对外周血和肝活检（FNA）样本进行了单细胞RNA测序。患者特征见表1。

表1 患者特征

研究结果

01 慢乙肝患者肝内AtM B细胞频率较低，不同临床分期间无明显波动

鉴定并注释了外周血和肝脏中5个B细胞簇（图1A）。与典型B细胞相比，AtM B细胞FCRL5（变化倍数FC：4.8）、ITGAX（FC：2.8）、TBX21（FC：2.3）高表达， CXCR5 低表达（FC：-1.6）（图1B和1C）。在外周血和肝脏的AtM B 细胞中，IFNLR1（FC: 1.8）和MX1（FC: 1.6）、MX2（FC: 1.3）、OAS1（FC: 1.5）和 IFI30（FC: 2.6）等干扰素刺激基因高表达（图1C），表明暴露于干扰素后的反应性。此外，在外周血和肝脏中，AtM B细胞的 PDCD1（PD-1）、CD274（PD-1L）、BTLA 和肝源性趋化因子受体CXCR3 的基因表达水平较低或检测不到。

肝脏内AtM B细胞频率相对较低，与外周血中的频率接近（IQR：4.8% vs. 3.5%）（图1D）。各临床分期外周血和肝脏中的AtM B细胞频率相对较低，总体在10%以下，不同分期无明显波动（图1E）。

02 慢乙肝患者肝内浆细胞频率明显高于外周血，特别是在高病毒载量和ALT升高阶段

与AtM B细胞相比，肝脏中浆细胞的频率明显高于外周血（IQR：10.8% vs. 3.2% ；P <0.0001）（图1D）。肝脏中浆细胞频率在慢乙肝临床分期间有波动（图 1F），特别是在以高病毒载量和ALT升高为特征的IA期和ENEG期频率较高。仅在浆细胞中检测到MKI67（FC：4.5）高表达的细胞增殖迹象，主要在慢乙肝IA期（图1G，箭头）。细胞周期评分分析结果显示，IA期的323个浆细胞中有42%处于G2/M细胞周期（图1H），进一步证实了这点。

图1 慢乙肝患者外周血和肝脏中B细胞的单细胞RNA测序结果

（A）外周血和FNA中注释的5种B细胞簇；（B）外周血和FNA中各B细胞簇的基因表达；（C）外周血和FNA中典型记忆B细胞和AtM B 细胞中CXCR5的相对基因表达，各B细胞簇干扰素刺激基因的相对基因表达；（D）外周血和FNA中5种B细胞簇相对频率；（E）不同临床分期慢乙肝患者外周血和FNA中AtM B细胞相对频率；（F）不同临床分期慢乙肝患者外周血和FNA中浆细胞相对频率；（G）不同临床分期FNA中B细胞的MKI67相对基因表达；（H）不同临床分期慢乙肝患者FNA中浆细胞的细胞周期评分

肝霖君有话说

探索慢乙肝免疫机制，有助于更好地将诱导有效免疫应答的治疗策略应用于临床，推动乙型肝炎治愈的发展。本研究结果表明浆细胞可能在慢乙肝的免疫机制中发挥作用，各临床分期的慢乙肝患者肝脏中浆细胞频率均明显高于外周血，特别是在高病毒载量和ALT升高的阶段，且肝脏浆细胞表现出活跃增殖的迹象，尤其在免疫活动期。已有多项研究显示B细胞应答在HBsAg清除过程中起到了重要作用，对于具体免疫机制还需要进一步探索。

参考文献：  

Osmani Z, Villanueva M A, Joseph-Chazan J, et al. Intrahepatic plasma cells, but not atypical memory B cells, associate with clinical phases of chronic hepatitis B [J]. Eur J Immunol, 2024.